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      利用梅里埃GP鑒定卡保存菌種

      發(fā)布時(shí)間: 2021-12-23  點(diǎn)擊次數(shù): 1623次
        梅里埃GP鑒定卡在微生物實(shí)驗(yàn)室成功地進(jìn)行細(xì)菌菌種保存,對(duì)于系統(tǒng)地分析流行菌株的生物學(xué)、分子生物學(xué)特征和耐藥性的變遷,以及對(duì)醫(yī)院感染病原學(xué)調(diào)查、新藥臨床研究都十分重要。
       
        把3種梅里埃GP鑒定卡直接從-20°C移至35°C,待小孔液體*融化后,以無菌手續(xù),用注射器抽吸出陽性生長孔內(nèi)的液體,點(diǎn)種于血平板或沙保弱平板,置35°C孵箱內(nèi)24~48h復(fù)蘇。復(fù)蘇菌落經(jīng)分離培養(yǎng)后,用VITEK系統(tǒng)對(duì)菌株進(jìn)行鑒定和藥敏試驗(yàn),以金黃色葡萄球菌ATCC25923、大腸埃希菌ATCC25922、綠膿假單胞菌ATCC27853作質(zhì)控。
       
        菌株復(fù)活率:258株細(xì)菌按初始鑒定的結(jié)果,以伯杰細(xì)菌分類為依據(jù),歸納為葡萄球菌屬、鏈球菌屬、腸桿菌科、腸球菌屬、假單胞菌屬、黃桿菌屬、不動(dòng)桿菌屬、念珠菌屬8大類。各類菌屬的細(xì)菌100%的存活時(shí)間:葡萄球菌屬、腸桿菌屬、念珠菌屬為29個(gè)月,腸球菌屬、黃桿菌屬、不動(dòng)桿菌屬為21個(gè)月,鏈球菌屬和假單胞菌屬.為10個(gè)月。
       
        生物學(xué)特性及耐藥譜變化:258株細(xì)菌中共218株復(fù)活成功,復(fù)活菌株的培養(yǎng)特點(diǎn)、形態(tài)特征、生化特性均與初始鑒定結(jié)果一致,細(xì)菌的凍融復(fù)活前后藥敏譜也基本一致,符合率為93.7%~100%。
       
        反復(fù)凍融的影響:從復(fù)活的各類菌株中選取30株的生化卡反復(fù)凍融5次,每次冰凍的時(shí)間保持24h以上。結(jié)果30株細(xì)菌5次反復(fù)凍融5次,每次冰凍的時(shí)間保持24h以上。結(jié)果30株細(xì)菌5次凍融均復(fù)活成功,且其生物學(xué)特性及耐藥譜未發(fā)生明顯的變化,證實(shí)凍融均復(fù)活成功,且其生物學(xué)特性及耐藥譜未發(fā)生明顯的變化,證實(shí)多次凍融對(duì)細(xì)菌的保存無影響。
       
        與半固體菌種保存法的比較:用梅里埃GP鑒定卡和半固體菌種培養(yǎng)基同時(shí)保存12株臨床分離菌及3株ATCC25922、ATCC25923、ATCC27853基同時(shí)保存12株臨床分離菌及3株ATCC25922、ATCC25923、ATCC27853標(biāo)準(zhǔn)菌株6個(gè)月對(duì)照,其中半固體中的菌株定時(shí)轉(zhuǎn)種傳代。結(jié)果兩種標(biāo)準(zhǔn)菌株6個(gè)月對(duì)照,其中半固體中的菌株定時(shí)轉(zhuǎn)種傳代。結(jié)果兩種方法保存菌株的生物學(xué)特性均一致。方法保存菌株的生物學(xué)特性均一致.

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