梅里埃腸桿菌科和革蘭氏陰性桿菌鑒定試劑盒（API 10 S）說(shuō)明書

腸桿菌科和其它非苛養(yǎng)革蘭氏陰性桿菌鑒定試劑盒（比色法）

說(shuō)明書

【產(chǎn)品名稱】

通用名稱：腸桿菌科和其它非苛養(yǎng)革蘭氏陰性桿菌鑒定試劑盒（比色法）

英文名稱：API 10 S

【包裝規(guī)格】

50 測(cè)試/盒

【預(yù)期用途】

用于來(lái)源于人體并經(jīng)過(guò)分離培養(yǎng)的腸桿菌科和其它非苛養(yǎng)革蘭氏陰性桿菌的鑒定。

該產(chǎn)品用于可導(dǎo)致腹瀉、血流感染、尿路感染等的腸桿菌科和其它非苛養(yǎng)革蘭氏陰性桿菌的鑒定，臨床常見(jiàn)

樣本來(lái)源有糞便、直腸拭子、尿、血等。

【檢驗(yàn)原理】

API 10 S 試驗(yàn)條由 10 個(gè)含有干燥底物的微量小管組成。這些測(cè)定是用菌懸液接種和復(fù)溶培養(yǎng)基。孵育過(guò)程

中，所產(chǎn)生的最終代謝產(chǎn)物通過(guò)自然反應(yīng)或加入附加試劑而變色。鑒定結(jié)果可根據(jù)說(shuō)明書的判讀表進(jìn)行讀出，

也可參照生化譜檢索手冊(cè)或鑒定軟件，得到鑒定結(jié)果。

【主要組成成分】

試劑盒組成(用于 50 個(gè)測(cè)試)

- 50 個(gè) API 10 S 試條

- 50 個(gè)孵育盒

- 50 張結(jié)果報(bào)告單

- 1 個(gè) 封口夾

試劑條成分

API 10 S 試條的成分請(qǐng)參閱說(shuō)明書后的結(jié)果判讀表。

需要但沒(méi)有提供的試劑和設(shè)備

試劑/儀器

- API NaCl 0.85 % 培養(yǎng)基 5 mL（產(chǎn)品號(hào). 20 230）或 API 菌懸液培養(yǎng)基, 5 mL（產(chǎn)品號(hào). 20 150）

- 試劑：TDA （產(chǎn)品號(hào). 70 402）

- JAMES （產(chǎn)品號(hào). 70 542）

- NIT 1 + NIT 2 （產(chǎn)品號(hào). 70 442）

- 氧化酶 （產(chǎn)品號(hào). 55 635*）

* 某些國(guó)家不銷售，請(qǐng)用相同功能試劑代替

- 礦物油 （產(chǎn)品號(hào). 70 100）

材料

- 吸管或 PSI 管

- 安瓿保護(hù)套

- 安瓿架

- 微生物實(shí)驗(yàn)室常規(guī)設(shè)備

【儲(chǔ)存條件及有效期】

2～8℃保存，有效期為 18 個(gè)月。

API 10 S 試條包裝于含干燥劑的密封鋁箔袋中。一旦打開(kāi)（*），未用完試條用密封夾（包含在試劑盒中）將包裝袋重新密封，2～8℃可保存 10 個(gè)月有效（或至包裝盒上的有效期）。

（*）建議開(kāi)封方法：在封口下方剪開(kāi)鋁箔裝，為防止意外損壞干燥劑，開(kāi)封時(shí)應(yīng)保持鋁箔袋垂直。

生產(chǎn)日期：詳見(jiàn)外包盒標(biāo)簽。

有效期至：詳見(jiàn)外包盒標(biāo)簽。

【適用儀器】

- apiweb TM 鑒定軟件（產(chǎn)品號(hào) 40 011）

- 微生物實(shí)驗(yàn)室常規(guī)設(shè)備。

【樣本要求】

API 10 S 不能直接用于臨床或其他標(biāo)本（如如血樣、尿樣和糞樣、直腸拭子等等）。被鑒定的微生物必須首先根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)的微生物技術(shù)在適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基上進(jìn)行分離。

【檢驗(yàn)方法】

氧化酶試驗(yàn)

? 嚴(yán)格按生產(chǎn)商使用說(shuō)明做氧化酶試驗(yàn)并將結(jié)果記錄在結(jié)果報(bào)告單上（第 11 個(gè)鑒定試驗(yàn)）。

試條的準(zhǔn)備

• 準(zhǔn)備一個(gè)培養(yǎng)盒（盤和蓋子），倒入約 5mL 蒸餾水或軟化水【或其它不含任何添加劑或能產(chǎn)生揮發(fā)性氣體的化學(xué)物質(zhì)的水（如 Cl2, CO2,等）】于盤的蜂窩小凹中，造成一個(gè)濕室。

• 在盤的長(zhǎng)邊寫上菌株編號(hào)（不要寫在蓋子上，因?yàn)椴僮鬟^(guò)程中很容易將蓋子放到其它試條上）。

• 從包裝袋中取出試條。

• 將試條放入培養(yǎng)盒中。

注：API 10 S 只適用于腸桿菌科和/或非苛養(yǎng) G－桿菌鑒定。對(duì)營(yíng)養(yǎng)有特殊要求并需必要防護(hù)措施的苛養(yǎng)菌（布魯氏菌 Brucella 和弗朗西絲菌 Francisella）不包括在 API 10 S 數(shù)據(jù)庫(kù)中，需用其他方法鑒定。

接種物的制備

• 按照產(chǎn)品說(shuō)明書中“警告和注意"的相關(guān)部分，打開(kāi)一個(gè) API NaCl 0.85%培養(yǎng)基安瓿（5mL）或一個(gè) API 懸浮培養(yǎng)基（5mL），或用不含任何添加劑的無(wú)菌生理鹽水或滅菌蒸餾水（5mL）。

• 用吸管或 PSI 管，從分離平板上取單個(gè)菌落。推薦使用 18~24 小時(shí)培養(yǎng)物。

• 仔細(xì)乳化成均勻的細(xì)菌懸液。

菌懸液制備好后須立即使用。

注 : 大多數(shù)弧菌屬嗜鹽菌。如懷疑為弧菌，則應(yīng)用 API NaCl 0.85%培養(yǎng)基制備菌懸液。

試條的接種

• 用同一只吸管，將菌懸液加入試條的管中（為避免在管底形成氣泡，將試條輕微向前傾斜并把吸管或 PSI管緊靠小杯邊緣以避免在管部形成氣泡）。

• CITE 試驗(yàn)，充滿管和杯。

• 其他試驗(yàn)菌液只加入管（不加入杯）。

• 在試驗(yàn) LDC, ODC, H2S 和 URE 小杯內(nèi)加入礦物油形成新月形凸起以保證厭氧環(huán)境。

• 蓋好培養(yǎng)盒蓋。

于 36°C ± 2°C 孵育 18～24 小時(shí)。

試條的判讀

• 孵育后，根據(jù)結(jié)果判讀表判讀所有反應(yīng)。

• 記錄全部結(jié)果于結(jié)果報(bào)告單上。

• 需加附加試劑的試驗(yàn)：

- TDA 試驗(yàn)：加一滴 TDA 試劑。顯示紅褐色為陽(yáng)性反應(yīng)。

- IND 測(cè)試：加一滴 JAMES 試劑。整個(gè)杯顯粉紅色為陽(yáng)性反應(yīng)。

- NO2試驗(yàn): 在 GLU 試驗(yàn)中各加入一滴 NIT 1 和 NIT 2 試劑，等待 2 到 5 分鐘。紅色為陽(yáng)性反應(yīng)。

注：硝酸鹽還原試驗(yàn)和吲哚試驗(yàn)必須最后做，以免這些反應(yīng)釋放的氣體干擾其他試驗(yàn)的結(jié)果判斷。加完附加試劑后注意不要再蓋蓋子。

解釋

鑒定結(jié)果根據(jù)數(shù)值編碼獲得。

• 數(shù)值編碼的確定：

在結(jié)果報(bào)告單，每 3 個(gè)試驗(yàn)為一組，每組的陽(yáng)性反應(yīng)分別賦予 1、2 或 4 的數(shù)值，將每組數(shù)值相加得到一個(gè) 4位數(shù)字的編碼。

• 鑒定：

鑒定結(jié)果是根據(jù)數(shù)據(jù)庫(kù) (V3.1)得到。

* 依據(jù)數(shù)值編碼：

-從檢索手冊(cè)中查找數(shù)值編碼。

* 依據(jù) apiwebTM 鑒定軟件：

-在鍵盤上輸入 4 位數(shù)字的數(shù)值編碼